法医DNA检验丨接触DNA定位
随着DNA检验技术灵敏度的提高,以及公安机关应用DNA技术破获的案件越来越多,接触DNA已经成为当前法医DNA实验室检测量最大的检材。接触DNA是通过皮肤接触而遗留在客体表面上的DNA,主要来源于人体皮肤脱落的上皮细胞。
因此,国内也常把接触DNA称之为脱落细胞DNA。研究表明,每人每天大约会自然脱落400,000个上皮细胞,这成为接触DNA的主要来源,也是接触DNA检验的物质基础。
接触DNA是法医DNA检验的重要证据,但因其特殊性,接触DNA并不易被肉眼所见,这也给接触DNA检验带来了困难,也是接触DNA检出率不高的主要原因。当前对于接触DNA的提取主要通过两种方法来实现,一是盲提,即对检材重点部位进行提取或对检材整体网格化无差别提取。
这种方法工作量较大,会增加检验成本,很多擦拭的棉签中并没有提取到有效DNA,同时也比较容易检出混合样本。二是借助于痕迹显现技术靶向提取,即通过一定的技术手段显现出客体上的接触痕迹,定位后再提取。
这种方法提取的精准度高,可以有效防止污染,节省检验成本,缺点是部分显现技术可能会影响DNA检出,应注意选择。
502熏显、茚三酮显现、真空镀膜是痕迹实验室常用的手印显现方法,这三种方法对接触DNA的提取以及DNA检验的影响,国内学者也都做过详细的研究。本次第六届全国法医DNA检验技术研讨会张译升在其报告《两种指纹显现方法对DNA检验结果的影响》中也对真空502和真空镀膜两种手印显现方法对DNA的检验做了比较研究。
结论是:“经过真空金属镀膜或真空502显现后的指纹的DNA检验结果,虽然在峰值和检出率上与未处理样本存在差异,但是其获得完整DNA分型的概率仍然可观,尤其是在实际案件的应用中,检出率和避免出现污染的效果优于盲提”。
报告中张译升老师也提到因为502熏显是在手印上形成一层胶膜,所以在显现出手印后,使用擦拭和粘取的方法不如剪取的方法效果好。根据我们的经验,502熏显后接触DNA检验效果还跟所使用的熏显胶有直接关系。常规使用的家用粘合剂502胶因其粘性较大,熏显后往往会将手印覆盖比较厚的一层胶,对后期的脱落细胞的擦拭、粘取、细胞裂解等都会形成阻力。
如果使用专用的高挥发性、低粘性熏显胶,效果可以得到明显的改善。主要是因为502熏显手印的核心原理是α-氰基丙烯酸乙酯在手印的纹线上发生聚合反应而将指纹显现出来,而家用的粘合剂502胶中的成分除了α-氰基丙烯酸乙酯外还有增粘剂、稳定剂、增韧剂、阻聚剂等添加成分,导致其粘性很高;而专用熏显胶成分几乎是纯α-氰基丙烯酸乙酯,不含人为添加成分,所以在熏显手印后不会覆盖过厚的α-氰基丙烯酸乙酯聚合物。
对于提回实验室的检材可以通过502熏显,真空镀膜等方式实现接触DNA的定位,而对于体积较大,无法提回实验室的检材只能在现场进行接触DNA的提取。目前市面上已有多款通过喷雾方法,然后通过多波段光源激发荧光来定位接触DNA的产品。
弘德网即将引进的法国CST公司的LumiDye就是其中的代表性产品。该产品使用方便,非常适合大面积物证接触痕迹的搜索和定位,而且可以使用365-505之间的任一波段的多波段光源作为激发光。在指纹条件较好的情况下,还可以显现出完整的纹线,拍照后即可进行指纹鉴定,又不影响后续的DNA检验。
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