气相色谱GC对中链甘油三酸酯中的脂肪酸组分含量检测
中链甘油三酸酯由椰子CocosnuciferaL.胚乳的坚硬干燥部分或油棕ElaeisguineensisJacq胚乳的干燥部分提取的脂肪油分离出的辛酸(C8H16O2)、癸酸(C10H20O2)等饱和脂肪酸,与甘油酯化而得的甘油三酯混合物,其中含辛酸(C8H16O2)与癸酸(C10H20O2)的总量不得少于95.0%。性状为无色至微黄色的澄清油状液体,可与二氯甲烷、石油醚或大豆油混溶,在甲醇中易溶,在水中几乎不溶。
常通过将中链甘油三酸酯的酯键水解,获得游离脂肪酸,再经过甲酯化衍生生成脂肪酸甲酯,峰面积归一化法检测判断中链甘油三酸酯的3个酯键上面结合脂肪酸的类型。测定方法在脂肪酸组成项下记录的色谱图中,供试品溶液中辛酸甲酯峰、癸酸甲酯峰的保留时间应分别与对照品溶液中相应峰的保留时间一致。
微源检测实验室查阅文献资料,分享一种利用气相色谱检测中链甘油三酸酯的组分和总含量的方法。取样品3.0g,置于100mL的回流瓶中,加甲醇和6%氢氧化钾醇溶液,水浴上回流15min,并不断振摇,待溶液澄清后取出放至室温,将溶液移入分液漏斗中,用正庚烷洗回流瓶并移入分液漏斗中,加水用力振摇提取,放置分层,水层再用正庚烷提取合并正庚烷层,水洗后脱水,即得供试品溶液。
色谱条件选择毛细管柱,程序升温,氢离子火焰检测器FID,进样口温度250℃,检测器温度260℃,进样量1μL,扣除溶剂峰,按百分面积归一化法计算中链甘油三酸酯中各组分的含量,精密量取对照品溶液2mL,置10mL量瓶中,加正庚烷定容,得混合对照品溶液。
取混合对照品溶液、供试品溶液、空白溶剂正庚烷,分别进样,得到供试品色谱图中有与己酸甲酯、辛酸甲酯保留时间相同的色谱峰,空白溶剂无此吸收峰,说明无阴性干扰,方法的专属性强。以对照品溶液的质量浓度(mg·mL-1)为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线,结果质量浓度和峰面积呈现良好的线性关系,通过逐级稀释计算辛酸甲酯、癸酸甲酯的定量限。
利用气相色谱测定中链甘油三酸酯的总含量并其中的两种主要脂肪酸组分含量,脂肪酸的沸点较高,不易挥发,通过对其进行衍生化处理,降低沸点进行了检测测定。检测结果准确可靠,检测方法简便灵敏,检出限,精密度等多能够达到现行标准。实验室拥有HPLC、GC-MS、LC-MS等多类专业检测设备仪器,遵照ISO17025和GMP等高标准进行管理,为生物医药领域伙伴产品生产过程中可能产生的杂质提供评估报告、方法开发、验证及样品检测等一系列完整的解决方案。
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